Методическая разработка практического занятия Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы ее изучения
методическая разработка

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БУРЯТИЯ

ГАПОУ «БАЙКАЛЬСКИЙ БАЗОВЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ МЗ РБ»

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА

практического занятия

по дисциплине      Основы микробиологии и иммунологии

тема занятия          Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы её изучения

Специальность      34.02.01.  Сестринское дело

Курс                        I первый

Селенгинск, 2023 г

План занятия № 4

Название Основы микробиологии и иммунологии

Специальность  Сестринское дело

Курс    I      Группа  622

Тема занятия  Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы её изучения Тип занятия    Практическое

Форма проведения  

Преподаватель  Андреевская М.А.

Цели: 

Знать:

● знать морфологию, физиологию, экологию микроорганизмов, методы их изучения;

● знать основы эпидемиологии инфекционных болезней, пути заражения, локализацию микроорганизмов в организме человека, основы химиотерапии и химиопрофилактики инфекционных болезней;

● знать факторы иммунитета, его значение для человека и общества,   принципы иммунопрофилактики и иммунотерапии болезней человека, применение иммунологических реакций в медицинской практике;

● факторы иммунитета, его значение для человека и общества, принципы иммунопрофилактики и иммунотерапии болезней человека, применение иммунологических реакций в медицинской практике.

Уметь:

● проводить забор, транспортировку и хранение материала для микробиологических   исследований;

● проводить простейшие микробиологические исследования;

● уметь дифференцировать разные группы микроорганизмов по их основным свойствам;

● уметь осуществлять профилактику распространения инфекции;

Формируемые ОК: 

● ОК 12. Вести здоровый образ жизни, заниматься физической культурой и спортом для укрепления здоровья, достижения жизненных и профессиональных целей.

Формируемые ПК: (согласно ФГОС)

● ПК 1.6. Соблюдать правила санитарно-гигиенического режима, охраны труда, техники безопасности и противопожарной безопасности.

● ПК 2.4. Соблюдать правила санитарно-гигиенического режима, охраны труда, техники безопасности и противопожарной безопасности

Развивающие: 

Развивать умение применять полученные знания на практике

Воспитательные: (с учетом ОК№ и формулировка)

Интеграция темы 

Междисциплинарные связи: формирование ОК12   происходит на дисциплинах Общего гуманитарного и социально-экономического цикла, Математического и общего  естественнонаучного цикла, общепрофессиональных дисциплинах, профессиональных модулях и окончательно сформировываются на  преддипломной практике.

ПК 1.6. и ПК 2.4. формируется на таких дисциплинах как иностранный язык, информационные технологии в профессиональной деятельности, анатомия и физиология человека, основы патологии, гигиена и экология, основы микробиологии и иммунологии,  психология.

Место проведения: кабинет №6

Продолжительность: 90 минут

Оснащение: Раздаточный материал методическое пособие, программное обеспечение  КТП, литература.

Источники информации

1.Основные источники

1. Основы микробиологии и иммунологии: учеб пособие К.С Камышева – Ростов-на-Дону, Феникс, 2020.

2.Левинсон У.Медицинская микробиология и иммунология / У. Левинсон ;

пер. с англ. под ред. д-ра мед. наук, проф. В. Б. Белобородо-ва. — 2-е изд., электрон. — М. : Лаборатория знаний, 2020. —1184 с.

3. Медицинская паразитология. Атлас : учебное пособие для СПО / О. Г. Макеев, О. И. Кабонина, П. А. Ошурков, С. В. Костю кова ; под редакцией О. Г. Макеева. — СанктПетербург : Лань, 2021. — 136 с. : ил. — Текст : непосредственный.

4. Дьячкова С. Я.  Иммунология : учебное пособие /С. Я. Дьячкова. — 2е изд., испр. — СанктПетербург : Лань, 2020. — 168 с.

2.  Дополнительные источники

1. Камышева К.С.  Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии й, Изд. 3-е - Учебное пособие – Ростов-на-Дону, Феникс, 2012.-281.

2. В.Б. Сбойчаков, Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований, Учебник для средних медицинских заведений, С-П, Спецлит, 2011.

3. Борисов Л.Б., Микробиология, иммунология, вирусология. Издательство: МИА, 2005.

3.  Интернет ресурсы

1. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (http//www.rospotrebnadzor.ru).

Технологическая карта (план занятий)

Приложение 1

Тема 2.1.  Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы её изучения

Инструкция: выберите один правильный ответ.

I вариант

1. В основе деления микроорганизмов на группы лежит:

а) морфология клеток

б) различные типы их деления

в) расположение в мазке

г) все ответы верны

2.Гонококки –это шаровидные бактерии, в мазках выглядят как:

а) вибрионы

б) микрококки

в) диплококки

г) сарцины

3. Стрептококки в мазке располагаются:

а) цепочками

б) тюками

в) скоплениями в виде гроздьев

г) поодиночно

4. Актиномицеты характеризуются следующими свойствами:

а) имеют вид тонких нитей

б) в основном обитают в почве

в) на концах клеток образуют споры

г) все ответы верны

5. Вибрионы – это:

а) извитые палочки

б) изогнутые палочки

в) тетракокки

г) микрококки

6. К спорообразованию способны:

а) стафилококки

б) бациллы

в) стрептококки

г) кишечная палочка

7. Хранителем наследственной информации у бактерий является:

а) спора

б) цитоплазма

в) капсула

г) нуклеоид

8. Эти микроорганизмы являются внутриклеточными паразитами:

а) хламидии

б) сарцины

в) стрептококки

г) клостридии

9. Флагеллин – это белок, входящий в состав:

а) оболочки

б) капсулы        

в) жгутиков

г) цитоплазмы

10. Расставьте этапы приготовления препарата в нужном порядке:

а) фиксация

б) приготовление мазка

в) окрашивание

г) высушивание

11. Укажите соответствия:

I Световая обычная микроскопия                         а) для изучения живых неокрашенных препаратов

II Фазово–контрастная микроскопия              б) для изучения окрашенных препаратов

II вариант

1. Сапрофитные микроорганизмы питаются:

а) органическими веществами мертвых организмов

б) неорганическими веществами

в) органическими веществами живых организмов

г) все ответы верны

2. Стафилококки в мазке располагаются:

а) цепочкой

б) попарно

в) в виде гроздьев

г) тюками

3. Сарцины имеют форму:

а) шаровидная

б) изогнутая

в) палочковидная

г) извитая

4. Бактерии штопорообразной формы называются:

а) вибрионы

б) спириллы

в) спирохеты

г) клостридии

5. В состав клеточной стенки бактерии входит:

а) крахмал

б) флагеллин

в) муреин

г) альбумин

6. Перитрихи- бактерии, имеющие следующее расположение жгутиков на клетке:

а) по всей поверхности клетки

б) на одном из концов клетки

в) на обоих концах клетки

7. Дополнительной структурой бактерии является:

а) нуклеоид

б) цитоплазма

в) ЦПМ

г) капсула

8. Бациллы - это:

а) аэробные споровые палочки

б) извитые бесспоровые бактерии

в) бесспоровые кокки

г) анаэробные споровые палочки

9. Укажите функцию нуклеоида в бактериальной клетке:

а) синтезирует белок

б) обеспечивает форму клетки

в) придает подвижность клетке

г) является хранителем наследственной информации

10. Грамм отрицательные микробы:

а) окрашиваются в сине-фиолетовый цвет

б) образуют стойкий комплекс с основными красителями

в) имеют красную окраску

11. Укажите соответствие:

I Физический вид фиксации препарата       а) ацетон

II Химический вид фиксации                         б) р-р спирта

                                                                          в) пламя горелки  

Приложение 3

Алгоритмы манипуляций для практического занятия по теме 2.1 Классификация бактерий. Морфология бактерий и методы её изучения

Задание №1 Схема приготовления мазка

Приготовьте мазок из зубного налета, окрасьте его и рассмотрите под микроскопом. Зарисуйте и опишите увиденное под микроскопом. Сделайте вывод.

Приготовление мазка из зубного налета:

1. Небольшое количество зубного налета снять острым концом спички.

2. Растереть на предметном стекле размером с пятикопеечную монету.

3. Мазок зафиксировать путем трехкратного проведения над пламенем

горелки.

4. Мазок окрасить по Граму.

5. Промыть водой.

6. Высушить фильтровальной бумагой.

7. Рассмотреть препарат под микроскопом.

Задание №2 Окраска мазка по Грамму

1. окрасить мазок генцианвиолетом ( 2 минуты,через фильтровальную бумагу);
2. бумагу удалить, оставшуюся краску слить;
3. окрасить мазок раствором Люголя (1 минута);
4. раствор Люголя слить и нанести несколько капель чистого 96% спирта (30-40 секунд, осторожно покачивать стекло);
5. тщательно смыть спирт водой;
6. окрасить водным фуксином (2 минуты);
7. промыть водой и высушить.

Грамположительные (Гр+) бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Грамотрицательные (Гр-) бактерии окрашиваются в красный цвет.

Окраска кислотоустойчивых бактерий. Кислотоустойчивые микроорганизмы обладают выраженной к неорганическим кислотам, спиртам, щелочам. Это связано с наличием в клеточной стенке и мембране сравнительно большого количества липидов. Бактерии этой группы очень плохо окрашиваются обычными способами, поэтому используют концентрированные растворы с подогревом. При последующей кратковременной обработке кислотой клетки, воспринявшие краску, не обесцвечиваются. Это позволяет отличить кислотоустойчивые бактерии. Их окрашивают по методу Циля-Нильсена, который разработан с учетом все указанных особенностей

Задание №3 Окраска по Цилю-Нильсену. Методика:

• нанести несколько капель карболового фуксина на фиксированный мазок. Покрытый фильтровальной бумагой, и подогреть до появления паров (3-5 минут);
• бумагу снять, мазок охладить и обесцветить 3% серной кислотой или 3% солянокислым спиртом (3-4 секунды);
• тщательно промыть водой;
• окрасить дефферовской синькой (3-5 минут);
• промыть водой и высушить.

Окаска спор. Зрелая спора с трудом поддается окрашиванию из-за низкой проницаемости стенки. При окраске по Граму спорообразующей культуры краска воспринимается только вегетативной частью микроба, а спора остается бесцветной. Проницаемость ее клетки резко увеличивается после обработки горячей соляной кислотой или при испольщовании концентрированного раствора краски в подогревом. Восприняв краску, спора при последующей обработке кислотой не обесцвечивается, в то время как вегетативные клетки немедленно отдают краску.

Задание №4 Метод Ожешко.

• нанести несколько капель 0,5% соляной кислоты на нефиксированный мазок и нагреть до появления паров (2-3 минуты);
• слить кислоту, промыть водой, высушить;
• зафиксировать в пламени;
• окрасить по методу Циля-Нильсена (при этом споры окрашиваются в красный цвет, а вегетативные формы – в синий). Часто для окраски спор используют только метод Циля-Нильсена.

Задание №5 Окраска включения волютина (по Нейссеру).

• Окрасить мазок уксуснокислой синькой Нейссера (2-3 минуты);
• Промыть;
• Окрасить раствором Люголя (30 секунд);
• Слить раствор Люголя и окрасить везувином (1 минута)
• Промыть препарат и высушить

Цитоплазма клетки, имеющая кислую реакцию, принимает желтый цвет. Зерна волютина – темно-синие, почти черные.

Задание №6  Окраска по Бурри (обнаружение капсул).

Для обнаружения капсул используют негативную окраску, т.к. окрашивается пространство между бактериями. Таким образом, образуется темное поле с неокрашенными бактериями.

• Смешать на предметном стелке немного капсульной культуры и каплю разведенной (1:9) туши;
• Высушить на воздухе и бактериоскопировать.

Модификация по Бурри-Гинсу включает создание фона краской конгорот, последующую фиксацию в 5% растворе соляной кислоты, дополнительную окраску водным фуксином. В результате – общий фон темный, капсулы бесцветны, сами бактерии – красные.

Задание №7 Окраска по Романовскому-Гимзе.

Относится к сложным методам окраски и применяется чаще всего для мазков-отпечатков из органов или мазков крови после фиксации в жидком фиксаторе. Позволяет выявить ядерные элементы бактериальных клеток и зерна волютина. Для окраски берут каплю готовой краски на 1мл воды, которая должна быть подщелочена до рН – 7,2.

• Поместить препарат (мазком вниз) в чашку Петри, подложив под края стекла спички или кусочки предметных стекол;
• Подлить краску сбоку так, чтобы она без пузырей подтекла под мазок (красить 1-24ч);
• Промыть водой (рН – 7,2) и высушить;

Протоплазма молодых клеток окрашивается в сине-фиолетовый цвет, ядерные элементы – в краснофиолетовый.

Задания для самостоятельной работы

1. Инструкция: в тетради письменно ответить на вопросы:

1. Основное различие между грамм положительными и грамм отрицательными бактериями?
2. Основные принципы классификации бактерий

3. Особенности актиномицетов, микоплазм, риккетсий, спирохет и хламидий.

2. Инструкция: заполните таблицу по образцу:

Приложение 4

Ситуационная задача 1.

У раненого с симптомами газовой гангрены взят на анализ материал из раневого отделяемого. На основании микроскопического исследования дан положительный предварительный ответ.

1 Какие морфологические формы бактерий могут быть обнаружены

при данном исследовании?

2 Какими методами следует продолжить исследование?

3 Какие препараты должен назначить врач для лечения?

Ситуационная задача 2.

Пострадавший в транспортной катастрофе был доставлен в стационар с обширными ранами, загрязненными почвой.

1 Какие бактерии могли быть занесены в рану с почвой?

2 Какие меры специфической профилактики следует провести в этом случае?

Ситуационная задача 3.

Рабочий во время земляных работ получил травму с поражением наружных покровов. Через 3 дня во время перевязки у него появились симптомы, подозрительные на газовую гангрену.

1 Каким экспресс-методом можно проверить предварительный диагноз

2 Какие препараты следует назначить для лечения?

Ситуационная задача 4.

При поступлении в хирургическое отделение новой партии кетгута образцы его были направлены для исследования в бактериологическую лабораторию.

1 С какой целью был направлен кетгут в лабораторию?

2 Какие исследования нужно провести, чтобы оценить пригодность

Ситуационная задача 5.

На приеме у хирурга находятся 5-летний ребенок и пожилой человек с небольшими травмами, военнослужащий с открытым переломом плеча. Всем оказана специфическая профилактика столбняка. Какой препарат и почему следует ввести каждому пациенту?

Ситуационная задача 6.

В отделение поступил пациент с подозрением на пневмонию, аб-

сцесс легкого. После пункции полости абсцесса удалено 15 мл гнойного

содержимого. При микроскопии гноя в большом количестве обнаружены

капсульные грамотрицательные палочки.

1 Какой микроорганизм является наиболее вероятным возбудителем

2 Уточнить микробную этиологию пневмонии.

Ситуационная задача 7.

У больного после плановой операции из отделяемого послеоперационной раны микроскопически выявлена грамотрицательная палочка, на МПА – ползучий рост, культура издает гнилостный запах.

1 О каком возбудителе нужно думать?

2 По каким свойствам идентифицировать?

3 Какие лечебные препараты применять?

Ситуационная задача 8.

При микроскопии гноя из грудной полости (абсцесс) обнаружены

грам (-) полиморфные палочки. Однако, при посеве гноя на питательные

Среды Эндо, МПА роста не было.

1 О каких микробах можно думать?

2 Какие микробиологические исследования нужно провести?

Приложение 5

Контрольные вопросы

1. Строение бактериальной клетки.

2. Спора бактерий, строение, назначение, отличия от спор грибов.

3. Принцип окраски бактерий по Граму, отличия клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий.

4. В каких случаях употребляются термины «бактерии», «бациллы», «клостридии»?

5. Грамположительные бактерии в какой цвет окращиваются?

6. Основные отличия между прокариотами и эукариотами.

7. Основные типы культур бактерий.

8. Признаки, применяемые для идентификации микроорганизмов.

9. Определения всех методов микробиологической диагностики.

10. Структура жгутика бактерий.

Приложение 6

Домашнее задание:

1. Выучить алгоритмы
2. Приготовиться к устному опросу по лекции, и практическому занятию №5

Литература: 1. Основы микробиологии и иммунологии: учеб пособие К.С Камышева – Ростов-на-Дону, Феникс, 2021.

2. Дьячкова С. Я.  Иммунология : учебное пособие /С. Я. Дьячкова. — 2е изд., испр. — СанктПетербург : Лань, 2020. — 168 с.