Бактерицидная активность настоев и экстрактов эпигейных мхов Богонного болота памятника природы федерального значения «Калужский Городской бор»

Бактерицидная активность настоев и экстрактов

эпигейных  мхов Богонного болота  

памятника природы федерального значения

«Калужский Городской  бор»

                                                                          Автор работы:

                                                                          Плахотняя Виктория Михайловна

                                                                          МБОУ «Средняя общеобразовательная

                                                                                        школа №26»  г. Калуги, 11 класс

                                                                          Научный руководитель:

                                                                          Тесник Юлия Валерьевна,

                                                                           учитель химии,

                                                                           МБОУ“Средняя общеобразовательная

                                                                                       школа №26”  г. Калуги

Калуга, 2013 г.

Оглавление

Введение

   Памятник природы федерального значения  «Калужский Городской бор» - это уникальный участок южного варианта соснового леса с примесью широколиственных пород сложной культуры, гордость  жителей нашего края.     На территории “Калужского Городского бора” расположено пять болот, самое интересное из  них -  Богонное болото, аналогов которому нет  в окрестностях Калуги. Богонное болото богато представителями отдела Bryophyta, которые являются интереснейшим объектом флористических и  микробиологических исследований.

   В последние десятилетия заметно возрос интерес к проблеме поддержания и восстановления микроэкологического статуса человека. Для этих целей все шире используют натуральные безопасные растительные фитопрепараты. Сфагнум, один из представителей отдела Bryophyta,  издавна использовался человеком в лечебных целях: в Америке, Англии, Шотландии и Ирландии для лечения фурункулов, в Китае сфагновым отваром лечили болезни глаз,  в России его применяли для лечения инфицированных ран, ревматизма, радикулита, артритов, заболеваний кишечника [14, 19].  В клинической медицинской практике сфагновый мох нашел применение в качестве перевязочного материала и широко использовался во время всех войн, включая первую и вторую мировую. Его применение основывается на высокой гигроскопичности дерновины, превосходящей вату, наличии дезодорирующих, бактерицидных, антигрибковых, ранозаживляющих и кровоостанавливающих свойств [19].  

   Не смотря на многовековую историю  применения  некоторых видов мхов в народной медицине,  представители этого отдела остаются малоизученными растениями и не используются в официальной медицине.

    Целью  исследования было выявление бактерицидной активности настоев и экстрактов   эпигейных мхов Богонного болота  памятника природы федерального значения «Калужский Городской бор».          

    Для достижения цели были  поставлены следующие задачи:

1)  проанализировать литературные источники по исследуемой проблеме;

2) собрать образцы бриофитов;

3) выявить видовой состав эпигейных мхов;

5) определить  степень бактерицидной активности настоев  учтенных мхов;

7) сравнить степень бактерицидной активности экстрактов учтенных мхов;

8) выявить мхи, обладающие наибольшей бактерицидной активностью.

    Объект исследования:  эпигейные мхи Богонного болота  памятника природы федерального значения  «Калужский Городской бор».

    Предмет исследования: бактерицидная активность  мхов.        

   Методы:  флористический анализ, маршрутный метод, фотографирование, камеральная обработка, анатомо-морфологический метод при помощи микроскопов МБС-10 и МИКМЕД-1 ЛОМО, метод автоклавирования,     стерилизация сухим жаром, метод посева  в пробирки со скошенной средой, метод посева сплошным газоном,   метод термостатирования микроорганизмов,  метод лунок, метод выделения чистой культуры способом Дригальского, суспензионный метод, микроскопический метод при помощи микроскопа "LABOVAL-4", метод приготовления фиксированных препаратов-мазков, простой метод окраски препаратов-мазков метиленовым синим.

     Изучение бактерицидной активности настоев и экстрактов эпигейных мхов  на территории Богонного болота  “Калужского Городского бора” является актуальной темой для научно-исследовательской работы. На сегодняшний день мхи “Калужского Городского бора” остаются малоизученными, информация о бактерицидной активности настоев и экстрактов мхов Богонного болота отсутствует.

  Полученные результаты дополняют сведения о биоразнообразии мхов “Калужского Городского бора” и мхов Калужской области. Результаты микробиологических исследований  могут быть использованы при выборе возможного источника сырья для получения лекарственных средств и биологически активных добавок с антимикробным  действиями.

   Настоящая работа является частью комплексных исследований  памятника природы федерального значения “Калужский Городской бор”,  начатых учащимися МБОУ “Средняя общеобразовательная школа №26” г. Калуги в 2012 году.  

Глава I.  Обзор литературы

   “Калужский Городской бор” располагает богатым фондом лекарственных сосудистых растений. Однако вопрос сырьевой базы  представителей группы бриофитов  и возможности практического применения их  в  традиционной медицине на этой территории остается практически не  изученным, как и на территории  Калужской области.

   А ведь известно, что с давних времен китайские целители, наряду с сосудистыми растениями, в лечебной практике использовали  и около 40 видов мхов  [19]. История применения сфагновых мхов в народной  медицине берет свое начало  с  ХI века  [14]. В клинической медицинской  практике       сфагновый мох нашел применение в качестве перевязочного материала во времена наполеоновских войн (1800–1814 гг.) и франко-прусской войны (1870–1871 гг.),  во время русско-японской (1904–1905 гг., а также во время первой (1914–1918 гг.) и второй мировых войн (1939–1945)  [19]. В результате активной лечебной практики врачи отмечали следующие положительные качества сфагновых подушечек: легкость, мягкость и упругость; способность прилегать к любым частям тела; легкое удаление с поверхности раны, без ее раздражения; долгосрочность сфагновых повязок (до 10 и даже 14 дней);  удобство при транспортировке раненых и больных; равномерное впитывание и  удерживание гнойного отделяемого раны всей поверхностью повязки, что способствовало  сухости и чистоте раны; способность поглощать газы и увеличивать скорость заживления  ран благодаря бактерицидным и лечебным свойствам сфагновых мхов.    Имеются сведения об изготовлении жителями Аляски лечебной мази из сфагнума, смешанного с животным жиром.    Из S. magellanicum Н.П. Кирьяновым были изготовлены экстракты, а И.П. Виноградовым из S. papillosum – сфагновая мазь, которые способствовали быстрому заживлению гнойных ран [19]. Эти работы впервые показали возможность получения из сфагнума лекарственных препаратов. Позднее у сфагновых мхов были выявлены антигрибковые свойства [1, 5].  Наиболее полный обзор истории применения сфагновых мхов в медицине до середины ХХ века представлен в работах Л. И. Савич-Любицкой [19].

   В начале ХХ века большое внимание стало уделяться изучению антибиотических свойств мохообразных. Было выяснено, что некоторые мохообразные способны подавлять рост весьма опасных патогенов: золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), кишечной палочки (Escherichia coli), стрептококков (Streptococcus sp.), сальмонеллы (Salmonella sp.) [22].

   С конца ХХ века активная  работа по изучению сфагновых мхов как потенциальных источников биологически активных веществ ведется в Сибирском государственном медицинском   и Томском государственном университетах: изучены фармакологическая активность 20% водно-этанольного экстракта из S. fuscum (Shimp) Klinggr [1, 5], впервые проведено подробное исследование состава  фенольного комплекса и мономерного состава ПСК, экспериментально доказано, что суммарный комплекс, выделенный из дерновины S. fuscum обладает противовоспалительной и анальгезирующей активностью, ранозаживляющими свойствами и противомикробным действием [5],  изучена антибактериальная активность экстрактов  8 видов растения рода Sphagnum (S. Fuscum, S. Capilifolium, S. Fallax, S. Warnsdorfii, S. Compactum, S. Rusowii, S. Subsecundum, S. jensenii), относящиеся к 4 секциям, на  Staphylococcus aureus [13].  Полученные  результаты   позволяют выбрать  S.fuscum  в качестве возможного сырья для получения препаратов и лечения воспалительных заболеваний кожи разной этиологии.

    Работа по изучению бактерицидной активности сфагновых мхов   ведется    в Республике Коми [23] . Из известных 33 видов из рода Sphagnum по результатам исследований наиболее удобными для медицинских целей оказались сфагновые мхи из секции Sphagnum, которые в высушенном состоянии менее крошатся и обладают большой сорбционной способностью. Это такие широко распространенные виды, как Sphagnum magellanicum и Sphagnum centrale.

   В  литературе имеются сведения о лекарственных свойствах не только сфагновых мхов,  но   и других представителей отдела Bryophyta [2]. При проведении таких исследований в качестве экстрагирующих веществ  брались вода, эфир, этиловый и метиловый спирты, раствор поваренной соли, ацетон, хлороформ. Полученные экстракты или сырые навески мхов испытывались in vitro с целью выявления их влияния на выживаемость и ферментативную активность нескольких видов грибов и 20 видов микроорганизмов (золотистый стафилококк, кишечная палочка, стрептококк гноеродный, холерный вибрион и др.). Как показали исследования, бактерицидными свойствами обладают следующие роды листостебельных мхов — Amblystegium, Bryum, Philonotis, Mnium, Polytrichum.

   В восточной медицине одним из лучших "медицинских" мхов считается кукушкин лен [23].     Из печеночников лечебные свойства отмечены у риччии плавающей (Riccia fluitans), маршанции полиморфной (Marchantia polymorpha) и коноцефалума конического (Conocephalum conicum) [23].

   Интересны исследования и химического состава мхов. В результате анализа литературных источников  выявлено, что  бактерицидная активность мхов обусловлена наличием органических кислот и полифенолов; не последнюю роль в антибиотической активности мохообразных играют терпеноиды [5]. Терпеноиды являются вторичными метаболитами, обеспечивающими наряду с другими функциями химическую защиту растений от патогенных микроорганизмов. Эти вещества  находят самое широкое применение в медицине.

   В Сибирском государственном университете проведены исследования полисахаридов пяти  видов рода Sphagnum (S. balticum (Russow) C. Jens., S. fallax (H. Klinggr.) H. Klinggr., S. fuscum (Schimp.) Klinggr., S. Girgensohnii Russow и S. lenense H. Lindb. ex Savicz) [3]. В результате работы в условиях in vitro выявлен противомикробный эффект полисахаридов  пяти видов рода Sphagnum в отношении Staphylococcus aureus.   Наибольший эффект установлен у   S. girgensohnii и S. fuscum

   В результате исследований химического состава и адсорбционных свойств  сфагновых мхов  кафедры аналитической химии Белорусского государственного университета  был выделен большой набор веществ с бактерицидными и противогрибковыми свойствами [20].  Биологически активные вещества извлекали из растения с помощью различных растворителей: дистиллированной воды, этанола, бутанола, эфира и хлороформа. Самым лучшим растворителем для экстрагирования веществ оказалась дистиллированная вода. Исследователи выделили из сфагнума шесть фенокислот (изохлорогеновую, фумаровую, кофейную, хлорогеновую, пирокатехиновую, федуловую) и шесть веществ из класса кумаринов (эскулетинн, эскулин, умбеллиферон, скополетин, кумарин, герниарин). Эти вещества обладали ярко выраженным бактерицидным действием, особенно сильно они действовали на культуры стафилококка и стрептококка. Экстракты из сфагнума оказались также губительными для грибковых инфекций. Ученые предположили, что противогрибковым действием сфагнум обязан прежде всего кумаринам.

   Исследования химического состава сфагновых мхов в Томской области показали, что сфагновые мхи  содержат такие природные антибиотики,  как сфагновые кислоты [1].  Кроме того, бактерицидные вещества сфагнумов термостабильны и не разрушаются при стерилизации. Выявлено, что противомикробную активность проявляет также пектиновые вещества и гемицеллюлозы   сфагновых мхов. Есть предположение, что ранозаживляющие и противогрибковые свойства этих растений связаны с их минеральным составом [5].  В результате исследований качественного состава основных групп биологически активных веществ  12 видов сфагновых мхов, проводимых М. Д. Федотовым и  А. П. Колоколовым  [22],  установлено присутствие флавоноидов, фенолкарбоновых кислот и полисахаридного комплекса, отсутствие дубильных веществ и производных антрацена, отмечены следовые количества кумаринов, алкалоидов и сапонинов.

    Таким образом, отдельные виды мхов содержат биологически активные соединения и обладают  бактерицидными свойствами, но химическая природа веществ, продуцируемых мохообразными и обладающих антимикробными свойства, до настоящего времени не совсем ясна.  Изучение антибиотических свойств бриофитов требует дальнейшего систематического изучения.

Глава II. Методика исследования и материал

2.1.  Характеристика района  и места исследования

   Исследование проводилось на территории  памятника природы федерального значения «Калужский Городской бор».  Он расположен в западной части территории г. Калуги. Площадь “Калужского Городского бора” 1049 га [15]. Границами бора являются: с восточной стороны — Яченское водохранилище, на юге — пойма р. Ока, на западе  - микрорайон Аненки, на северо-западе — граница проходит с Калужским лесхозом, на севере  и северо-востоке леса бора граничат с землями ОАО «Карачевская птицефабрика».

   Территория бора представляет собой  компактный сосновый  лесной массив, сохранившийся в своих границах с XVII в. “Калужский Городской бор” разделен на 25 кварталов (Приложение 1). По своему географическому положению и природным условиям территория бора входит в зону северо-западного района хвойно-широколиственных лесов в ее южном подрайоне.

   Калужский бор характеризуется господством плоских и пологонаклонных поверхностей с общим уклоном в сторону Яченского водохранилища и реки Оки.

   Климат района исследований умеренно-континентальный с резко выраженными сезонами года: умеренно жарким и влажным летом и умеренно холодной зимой с устойчивым снежным покровом. Господствующей воздушной массой в течение года является континентальный воздух умеренных широт. В зимнее время проникает холодный арктический воздух, летом -тропические воздушные массы. В течение всего года господствуют ветры юго-западного и западного направлений. Средняя скорость ветра 3,0 -5,3 м/сек [15].

   Среднегодовая температура воздуха колеблется от +3,8оС до +4,7оС  [15]. Средняя температура самого теплого месяца (июля) - +17,2оС, самого холодного (января) - -10,1оС. Среднегодовое количество осадков 600-660 мм, причем 2/3 их выпадает в виде дождя и 1/3 — виде снега. Максимальное количество осадков приходится на летнее время.

   Средняя продолжительность зимнего периода составляет 95 дней. Время появления устойчивого снежного покрова -15-20 ноября. Продолжительность залегания снежного покрова около 140 дней. Средняя высота снежного покрова 33 см. Глубина промерзания почвы в лесу — 28 см, на открытых пространствах — 38 см.

     Видовой состав мхов изучался на территории Богонного  болота, расположенного в  5 квартале 29 выделе  «Калужского Городского бора» (  Приложение 1).     Богонное    болото является  переходным осоко-сфагновым, его  общая площадь 0,3 га, тип ландшафта -  открытый с единичными деревьями, 40% зарастание березой, почва среднеподзолистая, супесчаная [16].

                              2.2.  Материалы и методы

   Материал собирался в течение  мая - августа 2013 года  во время маршрутных учетов. Сбор сырья производился ручным способом в естественных местах обитания видов. Камеральная обработка включала в себя разбор материала,  определение гербарных образцов, составление базы данных, составление гербария.  

    Идентификация собранных видов проводилась под руководством старшего научного сотрудника Национального парка “Угра” кандидата биологических наук Телегановой В. В. общепринятым анатомо-морфологическим методом при помощи микроскопов МБС-10 и МИКМЕД-1 ЛОМО. Для идентификации образцов использовались:  Краткий определитель мохообразных Подмосковья  Е.А. Игнатова, М.С. Игнатов, В.Э. Федосов, Н.А. Константинова [7]; Флора мхов средней части европейской России. Том 1. М. С.  Игнатов, Е. А. Игнатова [5];  Флора мхов средней части европейской России. Том 2. Игнатов, М. С, Е. А. Игнатова [6].  

     В работе использована карта  “План лесонасаждений памятника природы Федерального значения “Калужский Городской бор””, масштаб  1: 5000 [12].

   Частоту встречаемости видов  оценивали по следующей шкале: уникально  - 1 местонахождение;  редко - 2-3; спорадически - 4-8; часто - 9-13;  очень часто  - более 13.

Виды, занесенные в Красную книгу Калужской области, отмечены “!”.

    Микробиологические исследования проводились в “Испытательной лаборатории по качеству пищевых продуктов, продовольственного сырья и экологии”    г. Калуги  с использованием  стандартных методов качественных и количественных  анализов лекарственного растительного сырья [10, 17]: метод автоклавирования,  стерилизация сухим жаром, метод посева  в пробирки со скошенной средой, метод посева сплошным газоном,   метод термостатирования микроорганизмов (37оС,  24 ч.),  метод лунок, метод выделения чистой культуры способом Дригальского, суспензионный метод, микроскопический метод при помощи микроскопа "LABOVAL-4", метод приготовления фиксированных препаратов-мазков, простой метод окраски препаратов-мазков метиленовым синим. 

   В качестве питательной среды использовался  ГРМ-агар.   В качестве тест-культур использовали штаммы  Staphylococcus fleurettii,   выделенные из воздуха.   Для идентификации образца  использовали Определитель бактерий Берджи [12].

   Для определения бактерицидной активности из сырья учтенных видов (кроме Leucobryum glaucum,   Dicranella heteromalla, Climacium dendroides), собранного 20 августа,   получено 114 настоев (1:10): 57 настоев при комнатной температуре, 57 настоев  на водяной бане;    и     57   40%-ных этанольных  экстрактов. Настои и экстракты получали, используя технологические приемы в соответствии с требованиями ГФ XI [4].

   Степень устойчивости исследуемого штамма по отношению к настоям и экстрактам  определяли по следующей шкале [25]: устойчив – отсутствует зона подавления роста;  малочувствителен – диаметр зоны подавления роста до 10 мм; чувствителен – более 10мм.  Диаметр зоны подавления роста измеряли с помощью штангенциркуля с точностью до 1 мм (измеряемый диаметр проходил через центр лунки).

2.3. Результаты и обсуждение

   В результате проделанной работы установлен  видовой состав   эпигейных  мхов (Приложение 2) Богонного болота   памятника природы федерального значения  «Калужский Городской бор»    (по результатам исследования  мая - августа 2013 года).   Номенклатура дана по последнему чек-листу М.С. Игнатова с соавт. [24]. Принадлежность к семействам и секциям  приводится  по “Флоре мхов средней части европейской России” [5, 6].  После названия вида приведены экологические предпочтения и частота встречаемости.

        СЕМ. SPHAGNACEAE - СФАГНОВЫЕ

   Секция 1. Sphagnum

1. Сфагнум магелланский   Sphagnum   magellanicum Brid. – межкочье, окрайка болота; часто.

2. Сфагнум центральный  Sphagnum  centrale C.E.O.Jensen - межкочье,

 центральная часть болота; очень часто.

   Секция 2. Squarrosa (Russ.) Schimp.

3. Сфагнум оттопыренный  Sphagnum squarrosum Crome - мочажина, окрайка болота; спорадически.  

   Cекция 7. Cuspidata (Lindb.) Schlieph. Ex Schimp

4. Сфагнум береговой  Sphagnum riparium Еngstr. - окрайка болота, мочажина; редко.

5.Сфагнум    узколистный  Sphagnum angustifolium (C.E.O.Jensen ex Russow) C.E.O.Jensen - центральная часть болота,   открытое пространство, межкочье; спорадически.

6. Сфагнум обманчивый  Sphagnum fallax (H.Klinggr.) H.Klinggr. - центральная часть болота, межкочье; очень часто.

   Секция 8. Acutifolia Wils.

7. Сфагнум Гиргензона Sphagnum girgensohnii    Russow -                        центральная часть болота,     открытое пространство, мочажина; очень часто.

8. Сфагнум Руссова  Sphagnum russowii  Warnst.  - мочажина, центральная часть  болота; очень часто.

     СЕМ.   POLYTRICHACEAE  - ПОЛИТРИХОВЫЕ

9. Атрихум волнистый Atrichum undulatum (Hedw.) - окрайка болота, влажная почва,  обочина тропинки, затененное место; часто.

10. Политрихаструм  красивый Polytrichastrum formosum  (Hedw.) G.L.Sm. - вершина кочки,  окрайка  болота; спорадически.

11. Политрихум обыкновенный   Polytrichum commune   Hedw. - окрайка болота,   открытое пространство,  вершина и склон кочки; очень часто.

12. Политрихум  можжевельниковидный   Polytrichum juniperinum   Hedw. - почва, сухой участок,  окрайка болота; спорадически.

13. Политрихум сжатый   Polytrichum strictum Brid. (P. affine Funck, P. alpestre Hoppe) - вершина кочки,  центральная часть болота; очень часто.

СЕМ. LEUCOBRYACEAE -  ЛЕВКОБРИЕВЫЕ

14. ! Левкобриум сизый Leucobryum glaucum    (Hedw.) Еngstr. - окрайка болота, сырая канавка, почва; уникально.

      СЕМ. DICRANACEAE – ДИКРАНОВЫЕ

15. Дикранум метловидный  Dicranum scoparium  Hedw. - окрайка болота, сырая почва; спорадически.

16. Дикранум многоножковый  Dicranum polysetum  Sw. - окрайка болота, почва рядом с обочиной тропинки; спорадически.

17. Дикранелла разнонаправленная  Dicranella heteromalla          (Hedw.) Schimp.   -          окрайка болота,  почвенное обнажение тропинки; уникально.

                  СЕМ.  MNIACEAE -  МНИЕВЫЕ    

18. Плагиомниум близкий  Plagiomnium affine  (Blandow ex Funck) T.J.Kop. – окрайка болота, сырая почва, тропинка; часто.

19. Плагиомниум эллиптический Plagiomnium ellipticum (Brid.) T.J.Kop. - окрайка болота, сырая почва  на обочине тропинки; часто.

                 СЕМ. AULACOMNIACEAE -  АУЛАКОМНИЕВЫЕ

19. Аулакомний болотный Aulacomnium palustre  (Hedw.) Schwägr. - окрайка болота,  сырая почва, среди сфагнумов; спорадически.

     СЕМ. HYLOCOMIACEAE FLEISCH.  – ГИЛОКОМИЕВЫЕ

21. Плеврозиум  Шребера  Pleurozium schreberi (Вrid.) Mitt. – окрайка болота, затемненное место, склон кочки; часто.

      СЕМ. CLIMACIACEAE -   КЛИМАЦИЕВЫЕ  

22. Климаций древовидный Climacium dendroides (Hedw.) F.Weber & D.Mohr - затемненное место, сырая почва, окрайка болота; уникально.

   В ходе проведения бриологических исследований на  территории Богонного болота выявлено  22 вида эпигейных мхов, относящихся к  8 семействам. Наиболее многочисленные семейства: Sphagnaceae  (8 видов, относящихся к 4 секциям), Polytrichaceae (5). Выявлен один вид (Leucobryum glaucum) занесенный в Красную книгу Калужской области.

   В результате микробиологических исследований установлена бактерицидная активность  по отношению к  Staphylococcus fleurettii  (Приложение 3, Приложение 4):

- настоев: S.   magellanicum, S.  сentral, S. riparium, S. angustifolium, S. fallax, S. girgensohnii, S. russowii, Polytrichum strictum, Dicranum polysetum, Pleurozium schreberi.

- экстрактов: S.   magellanicum, S.  сentral, S. riparium, S. angustifolium, S. fallax, S. girgensohnii, S. russowii,   Polytrichum commune, Polytrichum juniperinum, Polytrichum strictum,  Dicranum polysetum,   Plagiomnium ellipticum, Pleurozium schreberi.

    Из полученных результатов видно, что ни один из  настоев бриофитов, приготовленных при комнатной температуре, не показал бактерицидную активность. 40%-ные  этанольные  экстракты мхов     показывают  большую бактерицидную активность по сравнению с настоями на водяной бане соответствующих видов.    

   Наибольшей активностью в отношении Staphylococcus fleurettii обладают экстракты представителей рода Sphagnum. Лишь  S. squarrosum (секция Squarrosa) показал бактерицидную активность равную нулю. Наибольший диаметр зоны подавления роста  (13,1 мм)  показали экстракты   S.   magellanicum (секция Sphagnum)  и S. fallax (секция Cuspidata).

    Анализ степени устойчивости исследуемого штамма приведен в таблице 1.

Табл. 1. Степень устойчивости Staphylococcus fleurettii     по отношению к настоям  экстрактам эпигейных мхов Богонного  болота памятника природы федерального значения “Калужский Городской бор”

Выводы

1.В районе исследований обнаружено  22 вида эпигейных  бриофитов, относящихся к 11 родам и 8 семействам.

2. Выявлен один вид (Leucobryum glaucum) занесенный в Красную книгу Калужской области.

3. Выявлена бактерицидная активность по отношению  к  Staphylococcus fleurettii   настоев  и экстрактов  13 видов мхов.  

3. Ни один из  настоев бриофитов, приготовленных при комнатной температуре, не показал бактерицидную активность.

4. 6 видов мхов (Atrichum undulatum,   Dicranum scoparium,    Aulacomnium palustre, Sphagnum squarrosum,   Plagiomnium affine, Polytrichastrum formosum) не показали бактерицидной активности ни в одной из исследуемых форм (настой при комнатной температуре, настой на водяной бане,  40%-ный этанольный экстракт).

5. Среди настоев, приготовленных на водяной бане, наибольшую бактерицидную активность показал настой  Sphagnum   magellanicum   (секция Sphagnum).

6. Среди 40%-ных этанольных экстрактов экстрактов наибольшую бактерицидную активность показали  экстракты  представителей рода Sphagnum: Sphagnum   magellanicum (секция Sphagnum)  и  Sphagnum fallax (секция Cuspidata).

7. Впервые выявлены бактерицидные свойства  Dicranum polysetum (настой на водяной бане, экстракт),  Pleurozium schreberi    (настой на водяной бане, экстракт).

Благодарности

Мы выражаем искреннюю благодарность  за ценные консультации и предоставление материалов для исследования главному лесничему  Городского Лесничества Кулагину Ивану Николаевичу;  старшему научному сотруднику Национального парка “Угра”  кандидату биологических наук Телегановой Виктории Владимировне за консультации и помощь в определении видов представителей отдела Bryophyta, директору Института Естествознания, доктору биологических наук, кандидату медицинских наук Лыкову Игорю Николаевичу за ценные консультации и помощь в проведении микробиологических исследований.

Литература

1.Бабешина Л. Г. Сфагновые мхи Томской области и перспективы их применения в медицине.  Автореф. дис… канд. биолог. наук / Л. Г. Бабешина. –  Томск, 2002. -159 с.    URL: http://www.dissland.com/catalog/sfagnovie_mhi_  tomskoy_ oblasti_i_perspektivi_ih_primeneniya_v_meditsine.html (дата обращения: 02.07.2013)

2.Бабешина Л.Г., Дмитрук С.Е., Мульдияров Е.Я. Фармацевтические аспекты использования сфагнового мха // Чтения памяти Ю.А. Львова. – Томск.– 1995.– С. 254– 36 24.  

3.  Бабешина Л.Г,     Горина Я.В.,   Колоколова А.П., Краснов Е.А., Карпова М.Р. Исследование полисахаридов  некоторых видов рода Sphagnum L. URL: http://elib.sfu-kras.ru/bitstream/2311/2324/1/10_Babeshina.pdf (дата обращения: 08.07.2013)

4. Государственная фармакопея  СССР.  XI издание. URL:   http://zakon.law7.ru/legal2/se5/pravo508/index.htm (дата обращения: 01.08.2013)

5. Дмитрук В. Н. Сравнительное фармакогностическое исследование растений рода Sphagnum и перспективы их использования.   Автореферат и диссертация по фармакологии/ - Пермь, 2008 г. URL: http://medical-diss.com/farmakologiya/sravnitelnoe-farmakognosticheskoe-issledovanie-rasteniy-roda-sphagnum-i-perspektivy-ih-ispolzovaniya (дата обращения: 02.07.2013)

6. Игнатов М.С., Игнатова Е.А. Флора мхов средней части европейской России. Т.1. М., 2003. С.1-608.

7. Игнатов М.С., Игнатова Е.А. Флора мхов средней части европейской России. Т.2. М., 2004. С.609-944.

8. Краткий определитель мохообразных Подмосковья / Е.А. Игнатова, М.С. Игнатов, В.Э. Федосов, Н. А., Константинова. - Издательство: КМК, Товарищество научных изданий "КМК", 2011.  - 320 с.

9. Космоснимок “Калужского Городского бора”  URL: http://wikimapia.org/22249822/ru/ (дата обращения: 15.01.2013)

10. Лыков И.Н.,  Шестакова Г. А. Теоретические и практические основы общей микробиологии. Калуга,  изд-во КГПУ, 2002. - 212 с.

11. Ледюкова С. И. Бактерицидные свойства сфагнового мха// Химия растительного сырья. 2008. №3. С. 129-134. URL: http://tele-conf.ru/problemyi-zhiznedeyatelnosti-rasteniy-i-zhivotnyih/bakteritsidnyie-svoystva-sfagnovogo-mha. (дата обращения: 02.07.2013)

12. Определитель бактерий Берджи. Том 1. Том 2. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П. и др.: М.: Мир, 1997. - 432 с.

13.  План лесонасаждений памятника природы Федерального значения “Калужский Городской бор” (Лесоустройство 2006г.), масштаб  1: 5000

14. Подтероб А. П. История применения растений рода Sphagnum  в медицине/ А. П. Подтероб, Е. В.Зуев// Химико-фармацевтический журнал. -2002. – Т.36, №4

15. Проект организации и ведения лесного хозяйства памятника природы Федерального значения “Калужский Городской бор” Городской управы Городского округа города Калуги. Том I: Пояснительная записка, 2006, Министерство природных ресурсов Российской Федерации, Федеральное агентство лесного хозяйства, ФГУП “Западное государственное лесоустроительное предприятие”

16. Проект организации и ведения лесного хозяйства памятника природы Федерального значения “Калужский Городской бор” Городской управы Городского округа города Калуги. Том II: Таксационное описание, учет лесного фонда, ведомости проектируемых мероприятий, 2006, Министерство природных ресурсов Российской Федерации, Федеральное агентство лесного хозяйства, ФГУП “Западное государственное лесоустроительное предприятие”

17. Прунтова О.В. Лабораторный практикум по общей микробиологии / О. В. Прунтова, О. Н. Сахно; Владим. гос. ун-т. - Владимир : Изд-во ВлГУ,  2005. - 76 с.

18. Рассадина, К. А. О всасывающих, бактерицидных и лечебных свойствах сфагнового мха / К. А. Рассадина // Природа. 1947. - № 9. - С. 71-74.

19. Савич-Любицкая, Л. И. Применение сфагнового (торфяного) мха в медицине / Л. И. Савич-Любицкая // Природа. - 1943, - №4.

20. Cвойства сфагновых мхов. URL: http://svcom.vologda.ru/Sphagnuminfo.html   (дата обрашения: 06.06.2013)

21. Седельникова Н. В. Первопоселенцы (лишайники и мхи). – Новосибирск, 1997. – 58 с..илл.

22. Федотова М. Д., Колоколова А. Д.      Исследование анатомо-морфологических особенностей и химического состава сфагновых мхов// сборнике статей по материалам Международной 67-й научной студенческой конференции им. Н.И. Пирогова (г.Томск, 2008 год) под редакцией проф. Новицкого В.В. и д.м.н. Огородовой Л.М. URL: http://tele-conf.ru/morfologicheskie-i-geneticheskie-osnovyi-zhizni/issledovanie-anatomo-morfologicheskih-osobennostey-i-himicheskogo-sostava-sfagnovyih-mhov.html (дата обращения: 3.07.2013)

23. Шубина Т., Железнова Г. Лекарственные свойства мохообразных ("Аптека" под ногами)  URL: http://ib.komisc.ru/add/old/t/ru/ir/vt/99-24/04.html (дата обращения: 21.05.2013)

24. Ignatov, M.S., Afonina O.M., Ignatova E.A. et al.  2006. Check-list of mosses of East Europe and North Asia. --Arctoa 15: 1-130.]. URL:  http://www.arctoa.ru/ru/ (дата обращения: 1.05.2013)

25. Основы микробиологии. Курс лекций.  URL:  http://collegemicrob.narod.ru/diagnostik/tema_16.html (дата обращения: 31.08.2013)