ОП.06 Основы микробиологии и иммунологии ТЕМА: Микроскопический метод исследования
презентация к уроку

Слайд 1

ПРАКТИКА ТЕМА: Микроскопический метод исследования Государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение Департамента здравоохранения города Москвы «Медицинский колледж №6» ОП.06 Основы микробиологии и иммунологии ПОДГОТОВИЛА ПАШЕДКО О.В. 202 2 Г.

Слайд 2

Цели и задачи: изучить информацию по теме занятия, выполнить задания СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ: Предмет и задачи медицинской микробиологии и иммунологии. Роль микроорганизмов в природе, жизни человека и медицине. Микроскопический метод исследования препаратов.

Слайд 3

Микроскопический метод исследования Изучение морфологии микроорганизмов ввиду их малой величины возможно только с помощью микроскопа. Для микроскопических исследований используют несколько типов микроскопов (световой, люминесцентный, электронный) и специальные методы микроскопии.

Слайд 4

Современная световая микроскопия обеспечивает увеличение до 2–3 тысяч раз. Основными характеристиками любого микроскопа являются разрешающая способность и контраст . Разрешающая способность – минимальное расстояние, на котором находятся две точки, различаемые как раздельные объекты. Контраст –возможность различать объекты и отдельные детали от их фона.

Слайд 5

Микроскопический метод исследования – метод обнаружения и определения микроорганизмов в исследуемом материале. При микроскопировании микроорганизмов можно установить: форму бактерий, их подвижность, определить количество клеток в исследуемом объеме. самым большим практическим достоинством метода является возможность с его помощью проводить быструю (в течение 1-3 часов) ориентировочную диагностику инфекционной болезни.

Слайд 7

Изучение препаратов живых микробов Прижизненная окраска микробов Прижизненной (витальной) окраской называется такая, при которой клетки микробов прокрашиваются в живом состояния. Для прижизненной окраски микробов применяют наименее ядовитые краски (метиленовая синька, нейтральная красная, везувин) в малых концентрациях (от 0,1 до 0,001%). Одним из простых способов является следующий: на чистое предметное стекло наливают насыщенный водный раствор метиленовой синьки, дают ему высохнуть и затем чистой сухой тряпочкой (или фильтровальной бумагой) протирают стекло, пока налет краски на нем не примет светло - голубой оттенок. Затем на стекло наносят каплю исследуемого материала и накрывают ее покровным стеклом. При микроскопировании можно видеть, как микробы постепенно окрашиваются в голубой цвет, оставаясь живыми (не теряя своей подвижности ). Можно воспользоваться более грубым способом: каплю исследуемого материала смешивают на предметном стекле с краской (0,1—0,01%), накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом.

Слайд 8

Приготовление и окрашивание препарата (неживых микробов) Приготовление окрашенного препарата включает: 1) приготовление мазка; 2) высушивание мазка; 3) фиксацию; 4) окраску. Препараты приготовляются на чистых предметных стеклах.

Слайд 9

1) Приготовление мазка. Мазок должен быть тонким, так как только при этом условии он удобен для изучения микробов, иметь определенную форму и размеры. 2) Высушивание. Препарат обычно высушивают при комнатной температуре на воздухе. 3) Фиксация. Фиксация препарата имеет целью: 1) убить микробов и сделать безопасным дальнейшее обращение с ними; 2) прикрепить мазок к стеклу, чтобы он не смывался при дальнейших манипуляциях; 3) сделать микробов более восприимчивыми к окраске, так как убитые микробные клетки окрашиваются лучше, чем живые.

Слайд 10

4) Микроорганизмы окрашивают , наливая краситель на поверхность мазка на определенное время. Большинство клеток микроорганизмов в естественных условиях не окрашены и поэтому плохо видны в световой микроскоп, с трудом поддаются изучению. В связи с этим Р. Кох первым стал пробовать окрашивать микроорганизмы для их изучения. В настоящее время можно выделить следующие виды окраски: – Окраска прижизненная (витальная). Для нее используют только витальные красители, не вызывающие гибель клеток. Таковыми являются, например, водные растворы в концентрации 0,2–0,001 % метиленового синего, конго красного. – Окраска фиксированных препаратов (неживых микробов) .

Слайд 11

Окраска фиксированных препаратов (неживых микробов) – Простая, проходящая в одну стадию с использованием одного красителя; в качестве красителей обычно используют метиленовый синий и другие. Сложная , способ окраски бактерий основанный на особенностях физико-химического строения микробной клетки. Применяется для детального изучения структуры клетки (макрокапсулы, жгутики, цитоплазматические включения и т.д.), а также для дифференциации данного микроба от других. Таким образом, сложные способы окраски микробов являются необходимым диагностическим методом в микробиологической практике. При сложном методе окраски используются два и более красителя. Наибольшее практическое значение имеет окраска по Граму и окраска по Цилю-Нильсону.

Слайд 12

Окраска по Граму Отношения различных видов бактерий к способу окраски по Грамму Грамположительные Гр(+) синии: 1. Все кокки, кроме нейссерий (менингококки, гонококки); 2. Палочки не образующие спор – бацилла Леффлера (BL)- палочка дифтерии, бацилла Коха (BK) – палочка туберкулеза, палочка проказы; 3. Все спорообразующие палочки – бациллы и клостридии. Грамотрицательные Гр(-) красные: 1.Из кокков – нейссерии (гонококки, менингококки); 2. Все не споровые палочки, кроме трех форм указанных в Гр(+); 3. Все извитые формы.

Слайд 13

Окраска кислотоустойчивых бактерий Кислотоустойчивость микробной клетки связана с особым химическим составом ее клеточной стенки (КС) – имеет большое количество липидов (жирных кислот, глико - и фосфолипидов, восков). Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий имеет очень низкую проницаемость и плохо окрашивается красителями. Поэтому приходится действовать сильными, концентрированными растворами красок с применение агентов (карболовая кислота) и подогреванием (протравливание). Основным способом окраски кислотоустойчивых бактерий является способ Циль-Нильсена. Именно этим способом пользуются для обнаружения кислотоустойчивых туберкулезных палочек в мокроте туберкулезных больных.

Слайд 14

Окраска кислотоустойчивых бактерий по Циль-Нильсену Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в рубиново - красный цвет , остальные составные части мазка, в том числе форменные элементы и некислотоустойчивые бактерии, — синие.

Слайд 15

ФОРМА БАКТЕРИЙ Различают следующие основные формы бактерий: шаровидные (сферические), или кокковидные, палочковидные (цилиндрические), извитые (спиралевидные), нитевидные . Существуют бактерии, имеющие треугольную форму. Обнаружены так называемые квадратные бактерии, которые образуют скопления из 8 или 16 клеток в виде пласта.

Слайд 16

Заключение микробиологического исследования Микроорганизмы идентифицируются по морфологическим признакам – форме, величине и характеру расположения микробов к друг другу, их подвижности. Устанавливается вид бактереий (Г+, Г-) по тинкториальному признаку – способности окрашиваться различными красителями. Определяется количество клеток в исследуемом объеме. Устанавливается возбудитель инфекционной болезни.

Слайд 17

Краткие итоги Микроскопический метод позволяет установить: форму бактерий, их подвижность, вид, определить количество клеток в исследуемом объеме. Необходимое условие - наличие микроскопа. Иногда достаточно применить только микро­скопический метод, однако для большинства болезнетворных микроор­ганизмов метод микроскопии недостаточен, используют несколько методов или их сочетания.

Слайд 18

Задание 1 БЛИЦ-ОПРОС Первым, кто увидел и описал бактерии, был … Изучение морфологии микроорганизмов возможно только с помощью ... Основными характеристиками любого микроскопа являются … При микроскопировании микроорганизмов можно установить ... Микроскопический метод включает 4 этапа: … Изучение препаратов живых микробов можно проводить путем их … в живом состоянии. Приготовление и окрашивание препарата (неживых микробов) проводят на ... Самым универсальным из сложных способов окраски является окрашивание по …. По Граму Грамположительные бактерии Гр(+) это: По Граму Грамотрицательные бактерии Гр(-) это: Основным способом окраски кислотоустойчивых бактерий является способ … Способом по Циль-Нильсену можно обнаружить … Различают 4 формы бактерий это: …

Слайд 19

Задание 2 Решите задачи в тетради. N п/п Задача Решение 1 Студенты на практическом занятии по микробиологии получили задание провести изучение микроорганизмов, выращенных на питательной среде, микроскопическим методом. Задание: 1.Укажите последовательность действий при микроскопическом методе исследования препаратов убитых микробов. 2.Какое оборудование необходимо для проведения этого исследования? 2 Студенты на практическом занятии по микробиологии приготовили мазок из зубного налета. Мазок приготовляют следующим образом: в каплю воды, помещенную у края предметного стекла, погружают небольшой кусочек зубного налета. Затем рядом с каплей воды помещают каплю красителя; обе капли тщательно смешивают петлей и из этой смеси делают мазок, затем накрывают предметным стеклом и рассматривают под микроскопом. Задание: Остались ли изучаемые микробы зубного налета живыми? Какую информацию могут получить студенты?